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血漿游離血紅蛋白測定方法
點(diǎn)擊次數(shù):1300 更新時(shí)間:2016-06-27
  分析:血漿游離血紅蛋白測定方法
  
  ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
  
  血紅蛋白具有類過氧化物酶活性,可催化H2O2釋放新生態(tài)氧,使鄰甲聯(lián)苯胺氧化發(fā)生顏色變化,由無色zui終變?yōu)樗{(lán)紫色。根據(jù)顯色深淺與標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較,可測出其含量。
  
  實(shí)驗(yàn)方法
  
  材料:
  
  1.2g/L鄰甲聯(lián)苯胺溶液
  
  2.1%H2O2
  
  3.10%醋酸溶液
  
  4.分光光度計(jì)
  
  方法:
  
  1.抽取靜脈血2-3ml,枸櫞酸鈉抗凝,離心分離血漿。
  
  2.按下表進(jìn)行操作,用分光光度計(jì),波長為530nm,以空白管調(diào)零,測定測定管的吸光度。
  

試劑 (ml)

測定管

空白管

2 g/L鄰甲聯(lián)苯胺溶液

0.5

0.5

患者血漿

0.02

/

1% H2O2

0.5

0.5

混勻后室溫放置10min

10%醋酸溶液

5.0

5.0

室溫放置10min

  
  3.計(jì)算公式
  
  血漿游離Hb(mg/L)=測定管吸光度/標(biāo)準(zhǔn)管吸光度×100
  
  實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算
  
  參考范圍:0-40mg/L
  
  注意事項(xiàng)
  
  1.一切容器避免血紅蛋白污染;
  
  2.采血要順利,器皿要干燥,檢測血漿要新鮮,及時(shí)分離,防止人為溶血;
  
  3.鄰聯(lián)苯胺溶液具致癌性,檢測時(shí)要小心,廢液要妥善處理,以免污染;
  
  4.雙氧水要新鮮配置,濃度要準(zhǔn)確
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