上海遠(yuǎn)慕生物詳細(xì)為您介紹miRNA提取試劑盒操作說(shuō)明書，用途，注意事項(xiàng)，品牌，價(jià)格等，本司是美國(guó)Omega品牌代理商，代理旗下所有產(chǎn)品，部分系列有：96孔板RNA 提取試劑盒I，96孔板病毒總RNA純化試劑盒，磁珠病毒ＤＮＡ/ＲＮＡ純化試劑盒，磁珠組織RNA提取試劑盒，RNA室溫保護(hù)液，RNA保護(hù)液，微量病毒ＤＮＡ／ＲＮＡ共提取試劑盒，其他系列等，價(jià)格實(shí)惠，訂購(gòu)！
名稱：miRNA提取試劑盒
品牌：Omega
供應(yīng)商：上海遠(yuǎn)慕
用途：從細(xì)胞、動(dòng)物、植物組織中同時(shí)提取小分子RNA或大分子RNA
miRNA提取試劑盒的提取目前主要采用兩種方法：Trizol法和離心柱法，操作步驟極為簡(jiǎn)單、無(wú)需過(guò)柱、去大RNA/DNA、再沉淀等復(fù)雜的步驟，即可獲得高產(chǎn)量、高純度、不含大RNA的小RNA。適用于高通量提取，2h內(nèi)可完成24個(gè)樣品的提取工作。應(yīng)用該miRNA提取試劑盒提取的小RNA（Small RNA）中，長(zhǎng)度在15～200nt范圍的RNA>90%，基本不含有大RNA和DNA。
RNA提取試劑盒工作原理：
首先采用一種包含非離子型洗滌劑的特殊細(xì)胞裂解緩沖液進(jìn)行樣品均質(zhì)化。由于蛋白質(zhì)保持完整，因此可取一部分裂解液直接用于常規(guī)蛋白質(zhì)分析應(yīng)用。剩余裂解液則采用了結(jié)合有機(jī)和固相提取優(yōu)勢(shì)、同時(shí)避免二者劣勢(shì)的操作程序進(jìn)行RNA的分離。
1.用1ml RNA-Solv® Reagent裂解細(xì)胞或組織（50-100mg植物組織），勻漿；
2.將勻漿液在室溫下靜置2-3min ；
3.向勻漿液中加入200μLlvfang，蓋緊離心管的蓋，劇烈振蕩15s，冰浴10min；
4.4℃，12000g，15min離心。勻漿分離為下層的有機(jī)相和上層的水相。RNA 留在上層水相中；
5.轉(zhuǎn)移不超過(guò)80%體積的上清至一新的2.0ml離心管中，加入 1/2體積的無(wú)水乙醇，振蕩混勻；
6.渦旋振蕩第5步中的混合物，然后將混合物全部轉(zhuǎn)移至2mL HiBind® RNA Mini column中（每次吸取不超過(guò)700μL液體，多余700μL時(shí)逐次加入）。室溫下10000*g離心30-60s，轉(zhuǎn)移流出液至新的2ml離心管中（注意記錄轉(zhuǎn)移出的體積），以用于分離小RNA。
7.加入0.9倍流出液體積的無(wú)水乙醇至第6步的離心管中，渦旋振蕩混勻。取 一個(gè)HiBind® RNA Mini column，置于一個(gè)新的2ml收集管中；
8. 取第7步的混合物加入吸附柱中，棄流出液；
9. 重復(fù)步驟8，將剩余樣品加入吸附柱中，10000g，30-60s，棄流出液；
10. 將吸附柱放在同一個(gè)2ml收集管中，添加500μl RWB Wash Buffer， 10000g，30-60s，棄流出液，重復(fù)使用收集管在第11步；
11. 再次添加500μL RWB Wash Buffer洗柱，如第10步。10000g，30-60s離 心，棄流出液。使用一空收集管，13000g，2min，來(lái)*干燥HiBind®matrix；
12.洗脫miRNA。轉(zhuǎn)移吸附柱至一新的1.5ml離心管中并在膜上加入15-30μL DEPC水（70℃預(yù)熱效果更佳）。室溫靜置5min，然后 13000g 1min 離心。如果預(yù)期的RNA超過(guò)20μg，進(jìn)行二次洗脫。
標(biāo)簽：RNA提取試劑盒 miRNA提取試劑盒
