Elisa試劑盒包被中所需條件?
今日,上海大學(xué)王琦同學(xué)向我司技術(shù)咨詢了elisa試劑盒在包被中所需要的條件?這種問題可能許多老師在實驗檢測中也有所疑問,對此,我司技術(shù)特別書面整理說包被及包被所需要的條件有哪些?方便今后客戶在遇到這類問題能夠及時的修正處理問題。
Elisa試劑盒在檢測中有一個詞叫包被,我們生物界將抗原或抗體固定在過程稱為包被(coating)。換言之,包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過程。蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的,靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團與固相載體表面的疏水基團間的作用力。
那么Elisa試劑盒包被中所需要的條件是什么呢?
包被用抗原或抗體的濃度,包被的溫度和時間,包被液的pH等應(yīng)根據(jù)試驗的特點和材料的性質(zhì)而選定??贵w和蛋白質(zhì)抗原一般采用pH9.6的碳酸鹽緩沖液作為稀釋液,也有用pH7.2的磷酸鹽緩沖液及pH7~8的Tris-HCL緩沖液作為稀釋液的。通常在ELISA板孔中加入包被液后,在4-8℃冰箱中放置過一夜,37℃中保溫2小時被認為具有同等的包被效果。包被的zui適當濃度隨載體和包被物的性質(zhì)可有很大的變化,每批材料需通過實驗與酶結(jié)合物的濃度協(xié)調(diào)選定。一般蛋白質(zhì)的包被濃度為100ng/ml-20ug/ml。
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