分子診斷是以核酸作為檢測(cè)對(duì)象，主要應(yīng)用于臨床各科的診斷中，如腫瘤、感染、遺傳等各方面，而核酸提取是分子診斷實(shí)驗(yàn)的“第一步"。近年來(lái)，磁珠已成為核酸提取過(guò)程中最chang用的工具之一。
磁珠的概念和分類
根據(jù)不同的表面處理與標(biāo)記，可將磁珠分成各種不同的應(yīng)用類型：
TiO2磷酸化多肽富集磁珠
磁珠表面覆蓋有一層TiO2材料，可以選擇性的與磷酸化的an基酸殘基：絲an酸(Ser)、酪an酸(Tyr)、蘇an酸(Thr)結(jié)合，而與酸性的an基酸殘基的非特異性結(jié)合最小。與傳統(tǒng)的IMAC技術(shù)相比，其靈敏度提高了1000倍，富集后磷酸化蛋白的質(zhì)譜檢出限達(dá)100 fmol。
谷胱gan肽(GSH)磁珠
該磁珠表面包被有瓊脂糖，并偶聯(lián)有谷胱gan肽，可以特異性的與谷胱gan肽-S-轉(zhuǎn)移酶(GST)結(jié)合，因而可用于純化帶有GST標(biāo)簽的重組蛋白。TALON"磁珠。TALON磁珠的原理是基于采用Co離子的固定化金屬離子親和技術(shù)(IMAC)，可用于純化帶有組an酸標(biāo)簽(6xHis)的重組蛋白。
Protein A和Protein G磁珠
帶有Protein A或Protein G基團(tuán)的磁珠，可廣泛應(yīng)用于IgG的純化、免疫沉淀(IP)和免疫共沉淀(Co-IP)等。
硅質(zhì)膜磁珠
這是一類最早出現(xiàn)的產(chǎn)品，廣泛應(yīng)用于DNA、RNA的純化。其原理類似于使用硅質(zhì)膜的離心柱，磁珠在高鹽條件下與核酸結(jié)合，而在低鹽環(huán)境下被洗脫，可用于全血、組織、細(xì)菌、病毒、植物等的核酸純化。
反相RPC磁珠
類似于反向?qū)游龅脑?，可用于多肽的分離純化。Jimenez等使用KingFisher96和Dynabead? RPC 18磁珠僅需20min就可以平行處理96個(gè)樣品，用于與疾病相關(guān)的血清中肽段表達(dá)譜的研究。
ChargeSwitch磁珠
ChargeSwitch磁珠的原理類似于離子交換技術(shù)，磁珠在pH & 6.5的緩沖液中帶正電，可與帶負(fù)電的核酸結(jié)合；在pH< 8.5的緩沖液中磁珠帶負(fù)電，使得之前吸附的核酸從磁珠上釋放。ChargeSwitch磁珠可在KingFisher平臺(tái)上、wan美使用。
核酸提取新興力量——磁珠法
自沃森、克里克的DNA雙螺旋模型誕生，生物學(xué)進(jìn)入到了一個(gè)全新的時(shí)代，在生物學(xué)界言必DNA，論必中心法則，對(duì)DNA的提取成為生物醫(yī)藥領(lǐng)域甚至農(nóng)林牧漁等領(lǐng)域內(nèi)所有學(xué)科科學(xué)研究的基礎(chǔ)，隨著基因診斷、轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)、個(gè)性化醫(yī)療等的快速發(fā)展，現(xiàn)在的核酸提取技術(shù)已經(jīng)不能夠滿足當(dāng)今生物技術(shù)的需要，急需能夠高通量、自動(dòng)化的核酸提取方法。在這種背景下，磁珠法核酸提取應(yīng)運(yùn)而生。
核酸提取法的原理
核酸結(jié)合到磁珠上主要依靠靜電作用、疏水作用和氫鍵作用。細(xì)胞或組織在裂解液作用下，其中的DNA/RNA被釋放出來(lái)。此時(shí)經(jīng)過(guò)表面修飾的超順磁性氧化硅納米磁珠即與核酸進(jìn)行“特異性結(jié)合"，形成“核酸-磁珠復(fù)合物"。然后在外加磁場(chǎng)的作用下，復(fù)合物即分離出來(lái)。最后經(jīng)過(guò)洗脫液洗去非特異性吸附的雜志、去鹽、純化后，即得到欲提取的核酸物質(zhì)。
磁珠法核酸提取的優(yōu)勢(shì)
隨著基因檢測(cè)、個(gè)性化給藥、產(chǎn)前診斷等的普及，在生物行業(yè)各領(lǐng)域都追求高通量、自動(dòng)化的今天，傳統(tǒng)DNA提取方法的局限愈來(lái)愈明顯，而磁珠法DNA提取的優(yōu)勢(shì)則愈來(lái)愈明顯：能夠?qū)崿F(xiàn)自動(dòng)化、大批量操作；操作簡(jiǎn)單、用時(shí)短；不使用傳統(tǒng)方法中的苯、lv仿等有毒試劑，安全無(wú)毒wan全符合現(xiàn)代環(huán)保理念；與核酸的特異性結(jié)合使得提取的核酸純度高、濃度大。
磁珠法提取DNA試劑盒要比傳統(tǒng)的方法（Chelex100 法、有機(jī)法、二氧化硅法、鹽析法等）更為簡(jiǎn)單、方便，轉(zhuǎn)移離心管的次數(shù)較少，不易污染等。遠(yuǎn)慕生物可為您提供健全的全自動(dòng)核酸提取實(shí)驗(yàn)方案！
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