抗凝是用物理或化學(xué)方法除去或抑制血液中的某些凝xue因子的活性,以阻止血液凝固。能夠阻止血液凝固的物質(zhì),稱為抗凝劑或抗凝物質(zhì)。檢查項目不同,所用的也不同。
實驗室常用抗凝劑的選擇有以下幾種,實驗中最常出現(xiàn)的幾個抗凝劑。
(一)枸櫞酸鹽
主要為枸櫞酸三鈉,能與血液中鈣離子結(jié)合形成螯合物,從而阻止血液凝固。枸yuan酸鈉與血液的抗凝比例是1∶9或者1∶4,一般用于凝血和紅細(xì)胞沉降率的檢查。因其毒性小,也是輸血保養(yǎng)液的成分之一。
(二)肝素
肝素是一種生理性抗凝劑,廣泛在于肺、肝、脾等幾乎所有組織和血管周圍肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞的顆粒中。它是一種含硫酸基團(tuán)的粘多糖,是分散物質(zhì),平均分子量為15000,帶有較多負(fù)電荷。其抗凝機制較為復(fù)雜,主要是加強抗凝xue酶Ⅲ(AT-Ⅲ)滅活絲an酸蛋白酶的作用,從而阻止凝xue酶的形成,并且有阻止血小板聚集等多種抗凝作用。每毫升血液抗凝需要肝素(15±2.5)IU,多為肝素的鈉鹽或鉀鹽 。它不影響血細(xì)胞體積,極少產(chǎn)生溶血,常用于血細(xì)胞比容、血pH、血氣分析及其他生化測定,是紅細(xì)胞滲透脆性試驗理想的抗凝劑。每管加含肝素1g/L的溶液1mL,在60℃以下烘干備用,可使5~10 mL血液不凝。肝素抗凝血不適于血涂片檢查。因其在瑞氏染色時會出現(xiàn)背景偏藍(lán),不適全血液學(xué)一般檢查,也不適合凝xue因子的檢查。
(三)乙二胺四乙酸鹽(EDTA)
常用的有鈉鹽和鉀鹽,能與血液中的鈣離子結(jié)合形成螯合物,使鈣離子失去凝血作用,從而達(dá)到抗凝目的。對血細(xì)胞形態(tài)和血小板計數(shù)影響很小,適用于多項血液學(xué)檢查,尤其是血小板計數(shù),但鈉鹽溶解度低于鉀鹽,EDTA-K2最shi用于全血細(xì)胞分析及血細(xì)胞比容測定,室溫下6h,紅細(xì)胞體積不改變。國際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(ICSH)建議血細(xì)胞計數(shù)使用EDTA-K2作為抗凝劑,用量為EDTA-K2-2H2O 1.5~2.2mg/ml血液。EDTA可抑制血小板聚集,不適用于凝血檢查及血小板功能試驗。
(四)草酸鹽
常用的有草酸鈉、草酸鉀和草酸銨,草酸根與血液的鈣離子形成草酸鈣沉淀使鈣離子失去凝血作用而阻止凝血。此種抗凝劑溶解度大,抗凝作用強。2mg可使1mL血不凝。因草酸鹽與血液中鈣離子結(jié)合生成草酸鈣沉淀,可使血細(xì)胞形態(tài)發(fā)生變化,故不宜制作血涂片檢查。同時草酸鹽也影響血液中某些成分的生物活性,故血液學(xué)中很少應(yīng)用。
雙草酸鹽抗凝劑是以草酸鉀和草酸銨按一定比例(通常4∶6)混合而成,適于血細(xì)胞比容測定。